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edgeR中怎么實現兩組間差異分析操作

edgeR中怎么實現兩組間差異分析操作,很多新手對此不是很清楚,為了幫助大家解決這個難題,下面小編將為大家詳細講解,有這方面需求的人可以來學習下,希望你能有所收獲。

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1.  讀取文件

需要讀取基因在所有樣本中的表達量文件,示例如下

gene_id ctrl-1 ctrl-2 ctrl-3 case-1 case-2 case-3
geneA 14  0  11  4  0  12
geneB 125 401 442 175 59 200

每一行為一個基因,每一列代表一個樣本。讀取數據的代碼如下

# 讀取表達量的表格
counts <- read.table(
  "gene.counts.tsv",
  header=T,
  sep="\t",
  row.names=1,
  comment.char="",
  check.names=F)

# 設置樣本分組
groups <- factor(c(1,1,1,2,2,2))

# 構建edgeR中的對象
y <- DGEList(counts=count,group=group)
2. 過濾count數很低的基因

根據CPM表達量對基因進行過濾,代碼如下

keep <- rowSums(cpm(y)>1) >= 2
y <- y[keep, , keep.lib.sizes=FALSE]
3. 歸一化

默認采用TMM歸一化算法,計算每個樣本的 sizefactor, 代碼如下

y <- calcNormFactors(y)
4. 進行差異分析

代碼如下

design <- model.matrix(~group)
y <- estimateDisp(y,design)
et <- exactTest(y)
5.  提取結果

將差異分析的結果保存到文件中,代碼如下

res <- et$table
write.table(res, "edgeR.xls", header = T, col.names = NA, sep = "\t" )

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